El microscopio de hoja de luz de dos fotones tiene ventajas como alta resolución y bajo foto-decoloramiento, y tiene aplicaciones extensas en el campo de la biología. Sin embargo, debido al compromiso entre el grosor y la longitud de la hoja de iluminación, no se puede equilibrar la resolución axial y el campo de visión, lo que limita su uso. Para resolver este problema, este artículo utiliza un modulador espacial de luz de cristal líquido para modular el haz de iluminación gaussiano común en un haz de Bessel, aprovechando la característica “no difractiva” del haz de Bessel para lograr una iluminación de hoja de luz grande y delgada, alcanzando una relación de longitud a grosor de 163. Sobre esta base, se diseñó y construyó un microscopio de hoja de luz de dos fotones con haz de Bessel, logrando una imagen 3D de alta resolución dentro de un campo de visión de 310 μm, con resolución lateral de 440 nm y axial de 1.9 μm. Este trabajo logró con éxito la imagen in vivo de embriones de pez cebra, permitiendo medir la velocidad de las células sanguíneas y segmentar y contar células óseas de la columna vertebral, validando el potencial del microscopio de hoja de luz de dos fotones de Bessel en imágenes biológicas in vivo.

Modulador espacial de luz de cristal líquido; Microscopio de hoja de luz de dos fotones; Haz de Bessel; Imagen in vivo