O microscópio de folha de luz de dois fótons possui alta resolução e baixa fotodegradação, com ampla aplicação no campo da biologia. Porém, devido ao compromisso entre a espessura e o comprimento da folha de iluminação, a resolução axial e o campo de imagem não podem ser alcançados simultaneamente, limitando seu uso. Para resolver este problema, este artigo utiliza um modulador espacial de luz de cristal líquido para modular o feixe de iluminação gaussiano convencional em um feixe de Bessel, usando a característica "não difrativa" do feixe de Bessel para realizar uma iluminação de folha de luz grande e fina, com relação de comprimento para espessura atingindo 163. Com base nisso, foi projetado e construído um microscópio de folha de luz de dois fótons com feixe de Bessel, alcançando imagem tridimensional de alta resolução em um campo de visão de 310 μm, com resolução lateral de 440 nm e axial de 1,9 μm. Este trabalho realizou com sucesso a imagem in vivo de embriões de peixe-zebra, possibilitando a medição da velocidade das células sanguíneas e a segmentação e contagem das células ósseas da coluna vertebral, validando o potencial do microscópio de folha de luz de dois fótons de Bessel em imagens biológicas in vivo.

Modulador espacial de luz de cristal líquido; Microscópio de folha de luz de dois fótons; Feixe de Bessel; Imagem in vivo