Le microscope à feuillet lumineux en deux photons présente une haute résolution et une faible photoblanchiment, avec de larges applications en biologie. Cependant, en raison du compromis entre l'épaisseur et la longueur de la feuille d’illumination, la résolution axiale et le champ d’imagerie ne peuvent être simultanément optimisés, limitant ainsi son usage. Pour résoudre ce problème, cet article utilise un modulateur spatial de lumière liquide cristallin pour moduler le faisceau d’illumination gaussien classique en faisceau de Bessel, tirant parti des propriétés "non-diffractives" du faisceau de Bessel pour obtenir un éclairage en feuillet lumineux large et fin, avec un rapport longueur/épaisseur de 163. Sur cette base, un microscope à feuillet lumineux à deux photons utilisant un faisceau de Bessel a été conçu et construit, réalisant une imagerie 3D haute résolution avec un champ de 310 μm, une résolution latérale de 440 nm et axiale de 1,9 μm. Cet article présente avec succès l’imagerie in vivo d’embryons de poisson-zèbre, permettant la mesure de la vitesse des cellules sanguines et le comptage segmenté des cellules osseuses de la colonne vertébrale, validant le potentiel du microscope à feuillet lumineux en deux photons de Bessel pour l’imagerie biologique in vivo.

Modulateur spatial de lumière liquide cristallin; Microscope à feuillet lumineux en deux photons; Faisceau de Bessel; Imagerie in vivo