Anwendung des Bessel-Zwei-Photonen-Lichtblattmikroskops in der In-vivo-Biobildgebung

BU Qingpan ,  

LUO Fanglin ,  

ZHANG Xingyun ,  

摘要

Das Zwei-Photonen-Lichtblattmikroskop zeichnet sich durch hohe Auflösung und geringes Photobleichen aus und findet breite Anwendung im Bereich der Biologie. Aufgrund des Kompromisses zwischen der Dicke und der Länge des Beleuchtungslichtblatts können jedoch axiale Auflösung und Bildfeld nicht gleichzeitig optimiert werden, was die Anwendung einschränkt. Um dieses Problem zu lösen, wurde in dieser Arbeit ein Flüssigkristall-Raumlichtmodulator verwendet, um den herkömmlichen gaußschen Beleuchtungsstrahl in einen Bessel-Strahl umzuwandeln. Unter Ausnutzung der „beugungsfreien“ Eigenschaft des Bessel-Strahls wurde eine große und dünne Lichtblattbeleuchtung erreicht, wobei das Verhältnis von Länge zu Dicke 163 beträgt. Darauf aufbauend wurde ein Bessel-Zwei-Photonen-Lichtblattmikroskop entworfen und aufgebaut, das eine dreidimensionale hochauflösende Abbildung im Sichtfeld von 310 μm mit lateraler Auflösung von 440 nm und axialer von 1,9 μm ermöglicht. In dieser Arbeit wurde erfolgreich die In-vivo-Abbildung von Zebrafischembryonen realisiert, was die Messung der Blutflussgeschwindigkeit und die Segmentierung und Zählung der Wirbelsäulenknochenzellen erlaubt und das Anwendungspotenzial des Bessel-Zwei-Photonen-Lichtblattmikroskops in der Lebendbildgebung bestätigt.

关键词

Flüssigkristall-Raumlichtmodulator; Zwei-Photonen-Lichtblattmikroskop; Bessel-Strahl; In-vivo-Bildgebung

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